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尼羅紅的使用說明！

尼羅紅是一種親脂性的惡嗪類熒光染料，對光敏感，與脂類物質結合并發出熒光，在激發波長530nm激發下，顯示強烈桔紅色熒光。同時在紫外光的照射下顯示紅色。另外，也可用于蛋白質染色。

產品名稱：尼羅紅

英文名稱：9-(diethylamino)benzo[a]phenoxazin-5(5H)-one

分子式：C20H18N2O2

分子量：318.37

產品規格：100mg

純度：≥95%

外觀：墨綠色粉末

溶解性：1mg/mL in EtOH

熒光光譜Ex/Em：530nm/635nm

保存條件：RT，避光，有效期3年

產品說明：

一、工作液制備

1）母液準備：取適量的尼羅紅用無水 DMSO 充分溶解制備 1mM 儲存液，按照單次用量分裝凍存，避免反復凍融，避光保存。

2）工作液準備：用 HHBS 或生理緩沖液，pH 7將母液按 1:1000 稀釋為1×尼羅紅工作液，漩渦混勻。

【注】：尼羅紅的實際染色濃度請參考文獻或實驗室體系來調整。

二、染色步驟

1）用檢測化合物處理細胞一段時間；

2）離心并調整細胞濃度為 1-5×105cell/管；

3）用 500µl 尼羅紅工作液重懸細胞；

4）室溫或 37oC避光孵育 5-10min；

5）吸掉染色工作液，用 HHBS 或適當緩沖液清洗細胞；

6）用500µl 預熱的 HHBS 或培養基重懸細胞，使細胞密度為 1-5×105cell/管；

7）熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測熒光信號，Ex/Em = 552/636 nm；

【注】

●對于貼壁細胞，可用 HHBS 或適當緩沖液清洗細胞，然后直接加入尼羅紅工作液孵育。

●細胞也可預固定，然后用尼羅紅工作液染色。

注意事項:

1）本品僅供科研實驗用，不做其它用途。

2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。